Использование перекиси водорода в работе с твердыми агаровыми средами

Было обнаружено, что при добавлении перекиси водорода к агару можно делать пересевы с минимальными шансами постороннего заражения.

Перекись может убивать бактерии, грибковые плесневые споры, тормозит рост дрожжей. Плохо конечно, что она убивает и полезные грибные споры, но с другой стороны, она также убивает и споры вездесущей зеленой плесени, что есть хорошо. Сформировавшие мицелий грибные колонии выделяют специальные энзимы, способные расщеплять перекись до воды и свободного кислорода. Причем это справедливо и для сформировавшихся колоний зеленой плесени - для них перекись уже не страшна. Но все же наилучший плюс перекиси водорода это то, что она убьёт все бактерии и вы никогда не столкнетесь с бактериальным заражением.

Для приготовления агарной среды необходим порошок экстракта солода, агар-агар и чашки Петри. Берем 3г порошка солода и 3г агар-агара (иногда они продаются в смеси, тогда берется 6г смеси) и разводим в 150мл воды. После тщательного перемешивания смесь переливается в емкость на 250- 300мл, закрывается ватно-марлевой пробкой и стерилизуется в скороварке 45мин. После этого еще горячая емкость со средой помещается на рабочий стол, предварительно обработанный дезинфицирующим раствором.

Перекись водорода разлагается при 140*F, поэтому необходим стерильный термометр - при достижени температуры среды 130*F к смеси добавляется 1мл перекиси водорода и размешивается термометром. Не пропустите этот момент, т.к. при 120*F среда застывает. После этого среда разливается в предварительно простерилизованные чашки Петри. Обычно этого объема хватает на 9-10 чашек. Количество перекиси вполне достаточное и может колебаться в пределах 6-10мл 3% перекиси водорода для литра(!) такой смеси.

После пересева мицелия, особенно первичного пересева, наблюдается период адаптации в течение 1-2 дней, когда мицелий формирует соответствующие энзимы для расщепления перекиси. В этот период мицелий практически не растет, а по завершении адаптации начинает скорость роста восстанавливается. Можно не ограничиваться только солодовым агаром и использовать любой другой, лишь добавляя перекись когда температура среды опустится до 120*F(~50*С)