Сывороточные маркеры HBV-инфекции: расширяем наши знания и понимание возможностей применения. Vol.3
Автор: Воронкова Наталья Васильевна, к.м.н., инфекционист, Университетская клиника Н-Clinic
Итак, классические биомаркеры хорошо, но мало...
Несмотря на широкое применение в клинической практике, классические биомаркеры HBV не способны удовлетворить в полной мере запрос медицинского сообщества на более точный прогноз течения заболевания и поиск более современных средств воздействия на вирус. Соответственно, существует настоятельная потребность в альтернативных биомаркерах, которые не только будут точно отражать внутрипеченочный пул cccDNA и ее транскрипционную активность, как основной фактор персистенции HBV, но и лучше будут характеризовать различные стадии заболевания и риск осложнений, уточнять интеграцию HBV, способствовать определению риска развития гепатоцеллюлярной карциномы (ГЦК)
К новым перспективным биомаркерам HBV-инфекции относятся в первую очередь РНК HBV и HBcrAg, так как оба маркера коррелируют с уровнем cccDNA и могут быть использованы в качестве индикаторов активности cccDNA.
🔄 Определение самой cccDNA вряд ли найдет широкое применение в повседневной клинической практике, поскольку для этого требуется проведение биопсии печени.
Обратная транскрипция прегеномной РНК (pgRNA) приводит к образованию нового генома релаксированной кольцевой ДНК (rcDNA).
Подробнее про жизненный цикл тут
Вирусная РНК не циркулирует свободно, а обнаруживается в вирусоподобных частицах. Секретируемые вирусные частицы, содержащие РНК HBV, имеют схожую плавучую плотность с частицами, содержащими ДНК HBV. Однако, они производятся в меньшем количестве и при блокировании обратной транскрипции число субвирусных частиц с РНК HBV увеличивается относительно частиц, содержащих ДНК HBV.
- Количество РНК HBV варьирует и зависит от фазы инфекции — они самые высокие в фазе иммунотолерантности и самые низкие у пациентов с неактивной инфекцией HBV.
Источником pgRNA является cccDNA, поэтому количество сывороточной РНК отражает транскрипционную активность cccDNA, а также размер ее резервуара.
- Количество РНК коррелирует с количеством ДНК HBV (у этих биомаркеров есть также ассоциация с количеством HBsAg, генотипом HBV и активностью АЛТ), именно поэтому может быть также использована для мониторинга ответа на терапию АН
При этом, определение уровня РНК является более перспективным, чем определение уровня ДНК HBV: на фоне лечения уровень ДНК HBV достаточно быстро снижается до неопределяемого, тогда как уровень pgRNA может долго оставаться относительно высоким, снижаясь на более отдаленных этапах терапии. Это различие в динамике pgRNA и ДНК HBV позволяет использовать pgRNA в качестве суррогатного маркера активности cccDNA при терапии АН для определения эффективности лечения.
У HBeAg-положительных пациентов со значительным снижением уровней РНК в сыворотке во время лечения AН с большей вероятностью достигалась сероконверсия HBeAg.
У HBeAg-отрицательных пациентов более низкие исходные уровни РНК в сыворотке были связаны с сохраняющимся ответом (нормальный уровень АЛТ и ДНК HBV ниже 2000 МЕ/мл).
- Определение РНК HBV можно также использовать для выявления пациентов, которые могут безопасно прекратить прием AН и достичь исчезновения HBsAg (функциональное излечение).
⚠️ Но есть нюансы: поскольку нет возможности определить происхождение сывороточной РНК HBV (из cccDNA, genomic DNA или варианты сплайсинга), клиническую и биологическую значимость уровней сывороточной РНК HBV следует интерпретировать с осторожностью.
А еще в настоящее время отсутствуют стандарты определения РНК HBV, доступные для проверки и сравнения анализов в разных лабораториях. В отсутствии этих стандартов имеющиеся на рынке тест-системы (Abbott m2000 RNA RUO) временно используют стандарты ДНК HBV.
2. HBcrAg (Hepatitis B core-related antigen) это комбиринрованны маркер состоящий из: HBeAg, HBcoreAg и укороченный прекоровый белок (22 кДа) и оценивает внутрипеченочную cccDNA и ее транскрипционную активность
HBcrAg и его биогенез показаны на рисунке:
- выявления пациентов с высокой вероятностью сероконверсии HBeAg
- определения фазы инфекции HBV
- определения рисков прогрессирования ГЦК и заболевания печени
- выявления пациентов, которые могут безопасно прекратить терапию АН и/или достичь потери HBsAg.
HBcrAg может быть обнаружен даже у пациентов с отрицательным результатом на HBsAg, что, по-видимому, является надежным маркером внутрипеченочной cccDNA
Количественное определение HBcrAg отдельно или в сочетании с измерением HBsAg и РНК HBV может использоваться для мониторинга ответа на текущую терапию и оценки новых терапевтических средств, находящихся в процессе клинических исследований.
В настоящее время тестирование HBcrAg проводится методом хемилюминесцентного иммуноферментного анализа (коммерческие тест-системы CLEIA; Lumipulse G HBcrAg, Fujirebio) и предназначены преимущественно для исследовательских целей.
В Японии уже имеется опыт в применении тестирования HBcrAg, но для рекомендации применения HBcrAg в широкой клинической практике необходимы дальнейшие исследования.
К новым дополнительным биомаркерам также относятся количественные тесты HBeAg и антиHBcore, но область их применения более узкая, вот почему в данном сообщении сделан акцент РНК HBV и HBcrAg.
Несмотря на значимый прогресс в создании новых биомаркеров HBV, в настоящее время ни один них не обладает явным преимуществом в прогнозировании естественного течения заболевания, ответа на противовирусную терапию или рецидива на всех стадиях хронического гепатита В.
В ближайшем будущем классические маркеры, такие как HBsAg, HBeAg и ДНК HBV, сохранят «свои позиции» в практическом здравоохранении.
В то же время, понимание необходимости достижения функционального выздоровления как основного условия улучшения отдаленного прогноза для пациентов с HBV-инфекцией, стимулирует разработку новых лекарственных препаратов, способных обеспечить достижение данной цели, что в свою очередь требует максимально эффективного лабораторного контроля.
Сывороточные биомаркеры, отражающие компартмент печени, будут играть все более важную роль, поскольку доступ к печеночной ткани и стандартная биопсия печени являются затруднительными для регулярного применения в рутинной практике.
Мониторинг внутрипеченочной активности HBV будет становиться все более важным по мере разработки терапий, нацеленных на cccDNA.
Вероятно, что РНК HBV, HBcrAg и другие новые биомаркеры, а также дополнительные еще не идентифицированные маркеры станут ценным дополнительным инструментом, который поможет разложить множественные компоненты непростого патогенеза HBV-инфекции.
Этот и предыдущие посты написаны по материалам:
1. Coffin CS, Zhou K, Terrault NA. New and Old Biomarkers for Diagnosis and Management of Chronic Hepatitis B Virus Infection. Gastroenterology. 2019 Jan;156(2):355-368.e3. doi: 10.1053/j.gastro.2018.11.037.
2. Inoue T, Tanaka Y. Novel biomarkers for the management of chronic hepatitis B. Clin Mol Hepatol. 2020 Jul;26(3):261-279. doi: 10.3350/cmh.2020.0032.
3. Kramvis A, Chang KM, Dandri M, Farci P, Glebe D, Hu J, Janssen HLA, Lau DTY, Penicaud C, Pollicino T, Testoni B, Van Bömmel F, Andrisani O, Beumont-Mauviel M, Block TM, Chan HLY, Cloherty GA, Delaney WE, Geretti AM, Gehring A, Jackson K, Lenz O, Maini MK, Miller V, Protzer U, Yang JC, Yuen MF, Zoulim F, Revill PA. A roadmap for serum biomarkers for hepatitis B virus: current status and future outlook. Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 2022 Nov;19(11):727-745. doi: 10.1038/s41575-022-00649-z.