Микробиологические аспекты валидации очистки (Часть 1 и 2)
Перевод статьи Tim Sandell "Microbiological Aspects of Cleaning Validation"
Переведено с Английского языка – Барчева Ангелина
Введение
Валидация очистки представляет собой подтверждение того, что очистка производственного оборудования действительно удаляет остатки продукта и загрязняющие вещества из частей и элементов оборудования.
Загрязняющие факторы, остатки которых следует очищать могут быть, но не ограничиваются: микроорганизмами; активными фармацевтическими ингредиентами; химическими веществами, образовавшимися в ходе стадий производственного процесса, такими как буферы; чистящими средствами (такие как моющие средства); а также остатки микробиологических питательных сред (при проведении симуляции асептического розлива).
Успешность валидации очистки зависит от эффективности разработанной процедуры очистки и полноты производимых действий.
Как и в случае с любым другим типом валидации, термин «валидация» фактически означает предоставление документированных доказательств того, что критерии приемлемости очистки были соблюдены.
Успешность очистка оценивается на основе уровня остаточного загрязнения (residues), которые обнаруживаются после проведенной процедуры очистки, либо непосредственно на оборудовании, либо косвенно в промывной воде, после финального ополаскивания.
Уровни остаточного загрязнения оборудования должны быть обеспечены на достаточно низком уровне, чтобы гарантировать, что следующий произведенный продукт не будет скомпрометирован отходами или загрязнением от предыдущего продукта (то есть, чтобы не произошло перекрестного загрязнения). Отдельно стоит проблема, связанная с микробиологической контаминацией.
Стандартно очистка оборудования осуществляется с помощью автоматизированного процесса (например, CIP - технологии очистки на месте) или вручную (что часто включает физическое перемещение оборудования в моечный отсек; иногда это называется COP - очистка вне места).
Для эффективности процесса очистки следует избегать ручной очистки, так как она подвержена большей изменчивости в силу человеческого фактора. Там, где
ручной очистки избежать невозможно из-за технических ограничений, необходимо обеспечить надежный контроль для обеспечения полноты процедуры очистки.
Верификация валидации очистки описана относительно хорошо в части проведения химического анализа. Что остается предметом споров и дискуссии так это оценка микробиологической нагрузки в ходе процесса валидации. Стоит ли проводить микробиологические тесты?
Серьезно встает вопрос что является наиболее явным источником контаминации: наличие микроорганизмов и остатков загрязнений как источников роста и развития последних или контаминация, происходящая во время ожидания очистки и/или ее этапов.
Для оценки этих микробиологических рисков требуется надежный план отбора проб на микробиологические показатели.
В этой статье оцениваются риски, связанные с микроорганизмами, и необходимые требования к процессу очистки производственного оборудования, обеспечивающие должный микробиологический контроль над процессом.
Регуляторные требования для валидации очистки
Валидация очистки является обязательным требованием для производства фармацевтической продукции. В США необходимость изложена в Своде федеральных правил (CFR). В частности:
PART 111--CURRENT GOOD MANUFACTURING PRACTICE INMANUFACTURING,
PACKAGING, LABELING, OR HOLDING OPERATIONS FOR DIETARY SUPPLEMENTS
§ 111.27(d) You must maintain, clean, and sanitize, as necessary, all equipment, utensils, and any other contact surfaces used to manufacture, package, label, or hold
components or dietary supplements
PART 211 -- CURRENT GOOD MANUFACTURING PRACTICE FOR FINISHED
PHARMACEUTICALS
§ 211.67 Equipment cleaning and maintenance
PART 820—QUALITY SYSTEM REGULATION
§ 820.70(e) Contamination control
Каждый производитель должен разработать и поддерживать процедуры, предотвращающие загрязнение оборудования веществами, которые могут оказать неблагоприятное воздействие на качество готового продукта. У Управления по контролю за продуктами и лекарствами США и Европейского агентства по лекарственным средствам совместно с PIC/S имеются соответствующие руководства по валидации очистки.
Руководства начинаются с необходимости иметь письменные процедуры, описывающие, как будет проводиться валидация, а также разъясняющие, кто несет ответственность за проведение процесса.
В протоколе валидации должны быть указаны методы оценки; критерии приемлемости; и количество (повторностей) проведенных циклов. Нет никаких нормативных указаний относительно количества необходимых повторностей в ходе валидации; однако, по умолчанию, обычно выполняется три повторности, чтобы продемонстрировать, что полученные результаты не являются случайными. Выполнение трех повторностей предполагает, что процесс является последовательным. Однако на это количество могут влиять другие переменные, такие как различные типы продукта, где могут потребоваться выполнение большего количества циклов очистки. Методы, выбранные для каждого этапа оценки, сами должны быть валидированы.
Также следует добавить примечание о том, когда требуется повторная валидация и временной интервал между первоначальной валидацией и повторной. Что касается критериев приемлемости, большинство международных регуляторов не устанавливают критерии приемлемости, а вместо этого ожидают, что производитель сам определит их на основе оценки риска. Микробиологические критерии приемлемости будут описаны далее.
При рассмотрении вопроса о покупке нового оборудования для производства необходимо учитывать требования к валидации очистки и включать ожидаемые результаты валидации очистки в Спецификацию требований пользователя (URS).
На валидацию очистки влияет время, которое оборудование стоит до, после и во время процесса. Микробиолог предприятия должен иметь возможность влиять на выбор используемых средств для очистки и качество используемых чистых сред (таких как вода и сжатый воздух, а также состояние контролируемой среды или чистого помещения, в котором оборудование хранится или обрабатывается).
В чистых помещениях рекомендуется контролировать влажность в зонах, где размещается и хранится оборудование (до и после очистки), чтобы снизить уровень влажности (учитывая, что влажная среда поддерживает выживание и рост многих микроорганизмов и имеет особую связь с грамотрицательными бактериями и грибами).
Химические вещества используемые в очистке
Типы выбранных чистящих средств в зависимости от природы химического вещества и вида (и количества) микроорганизмов, присутствующих на данной поверхности будут оказывать различное воздействие.
Чистящие агенты, которые представляют собой комбинацию: щелочное соединение (на основе гидроксида натрия) и кислоты (такой как соляная кислота), должны быть включены в валидацию очистки.
Подобные средства обычно не включают в исследования валидации дезинфектантов,
что повышает значимость проверки их эффективности в ходе валидации очистки.
Эти агенты будут оказывать определенный уровень микробной инактивации; однако их эффективность на месте использования зависит от таких факторов, как концентрация, температура и время воздействия:
Щелочь — это общий термин, относящийся к коррозионной природе ряда химикатов. Обычно при очистке используется гидроксид натрия или калия. Гидроксид натрия — это алкилирующий агент (щелочь натрия). В процессе обработки гидроксид натрия добавляется в воду, нагревается, а затем используется для очистки технологического оборудования, резервуаров для хранения и т. д. Он может растворять смазку, масла, жиры и отложения на основе белка.
Гидроксид калия — это бесцветное твердое вещество; при прочих равных условиях он похож на гидроксид натрия.
Эти химические вещества могут уничтожать микроорганизмы путем окисления и могут проявлять депирогенизирующий эффект, разрушая бактериальный липополисахарид при условии соблюдения достаточного времени контакта.
Кислоты, используемые при очистке производственного оборудования, включают соляную кислоту и лимонную кислоту. Эти кислоты используются для удаления накипи и минералов. При правильных концентрациях и при достаточном воздействии кислоты могут уничтожать микроорганизмы.Хелатирующие агенты такие как ЭДТА (EDTA).
Поверхностно-активные вещества
Поверхностно-активные вещества, используемые при очистке производственного оборудования, включают лаурилсульфат натрия и додецилбензолсульфат натрия. Такие агенты увеличивают дисперсию и эмульгирование загрязнений. Они могут помочь отделить микроорганизмы от поверхностей.
Растворители помогают удалять органические загрязнения. По мере удаления органических загрязнений микроорганизмы могут быть вытеснены с поверхностей.
Многие коммерческие чистящие средства содержат в составе (помимо воды) поверхностно-активное вещество, щелочь (например, гидроксид натрия) и хелатирующий агент.
Важно отметить, что основное применение многих моющих средств — удаление остаточных загрязнений (residues); и то, что некоторые из них обладают антимикробными свойствами, является плюсом но не основной целью. Поэтому данные химические соединения не следует рассматривать как дезинфицирующие в том смысле, что дезинфекция определяется как известное значение (D-value*) сокращение популяции микроорганизмов, что подтверждается контролируемыми лабораторными исследованиями.
Помимо применяемых химических веществ, другие аспекты процесса очистки могут оказаться пагубными для выживания микроорганизмов. К ним относятся температура воды, используемой для очистки (особенно там, где температура выше 60 C) и диапазоны pH ниже 4 и выше 11.
Стадия промывки водой удаляет чистящие вещества и вымывает микроорганизмы, находящиеся в планктонном состоянии (свободно плавающие). Финальная промывка водой проводится водой для инъекций (актуально для всех типов фармацевтических продуктов).
Важный момент, который требует внимание - не оставлять оборудование заполненное промывной водой после финальной промывки. По этой же причине последний этап процедуры очистки должен включать сушку, возможно, с добавлением растворителя (например, 70% стерильного изопропилового спирта) или промывку стерильным сжатым
воздухом; таким образом, гарантируя отсутствие влажности, а значит и отсутствие возможности для роста микроорганизмов.
Типичный процесс очистки оборудования:
1. Инициация, например водой очищенной для очистки от первичных загрязнений
2. Очистка, например нанесение чистящего агента. Может быть 1-ступенчатой или многоступенчатой (например, с применением щелочи, а затем кислот)
3. Промывка (очистка от чистящего агента, обычно водой очищенной)
4. Финальная промывка, используя воду для инъекций (зависит от производимого продукта)
5. Сушка (например, сжатый воздух)
Критические параметры процесса и критические параметры качества
На основании вышеизложенного, подходящими критическими параметрами процесса для проверки очистки являются:
• Время (максимальное время ожидания в грязном и чистом состоянии; время выполнения процесса очистки).
• Активность (химическое воздействие, количество промывок водой и т. д.).
• Химические агенты (концентрация).
• Температура (температура очистки).
Критические параметры процесса являются ключевыми переменными, влияющими на производственный процесс.
Уровень необходимой очистки зависит от стадии процесса, на которой используется оборудование, и приемлемого уровня остаточного микробного загрязнения (если таковое имеется). На ранних стадиях производственного процесса оборудованию обычно требуется более легкий уровень очистки (по сравнению с оборудованием, используемым для продукта, находящегося на промежуточной или конечной стадии).
Более того, уровни очистки должен быть выше, если за очисткой
следует санитарная обработка (химическими веществами с доказанными дезинфицирующими свойствами, такими как гипохлорит натрия; или паром) или стерилизация (как это требуется в отношении производства стерильных продуктов). Это приводит к разделению производства стерильных и нестерильных продуктов и степени остаточных микроорганизмов. Допустимые уровни для оборудования, используемого при нестерильном производстве, требуют отдельной оценки рисков и установления пределов по сравнению с оборудованием, используемым для асептического производства. Эти нюансы изложены в этом разделе.
Остаточные загрязнения продуктом, содержащие консервант (например, при производстве нестерильной мази), вероятно, будут представлять меньший риск, чем белковый продукт.
Различные микроорганизмы могут формировать различные типы реакций с остаточными загрязнениями с точки зрения прикрепления к поверхности оборудования. Такой риск трудно просчитать, поэтому необходимо придерживаться цели максимального снижения микробного загрязнения.
Дополнительные микробиологические вызовы связанные с хранением оборудования:
d) Эффективность процесса очистки для удаления микроорганизмов и эндотоксинов;
e) Хранение оборудования после очистки перед использованием или последующим этапом дезинфекции или стерилизации (в отношении повторного загрязнения из окружающей среды).
Каждый из этих сценариев должен быть предметом оценки риска.
Микробиологические тесты для оценки эффективности очистки
При микробиологическом тестировании лучше всего использовать комбинированный подход, поскольку разные методы обнаруживают разные типы загрязнений.
Первая группа методов — это методы прямого отбора проб, которые покажут уровень оставшегося на поверхностях загрязнения. Они особенно полезны при ориентировании на области, которые труднее всего очищать. Вторая группа — это косвенные методы в форме смывов с оборудования и технологических участков оборудования.
Такие методы свидетельствую лишь о том, что финальная промывка оборудования была успешна и что загрязнение больше не смывается с поверхности и более применима в случае проведения анализа на бактериальные эндотоксины так как
остается единственным практичным способом измерения их.
Микробиологические тесты подразделяются:
Осуществляется либо с помощью свабов (зонд-тампоны), либо контактных пластин. Из двух методов контактные пластины, как правило, предоставляют более точные результаты. Контактные пластины позволяют определить уровень обсемененности для установленной площади поверхности (на основе площади поверхности агара, которая составляет от 24 до 25 см2).
Свабы в свою очередь имеют больше вариабельности в части предоставления результатов, так как смачиваемость зонд-тампона и количество движений при отборе сложнее контролировать. Контактную пластину, используют со специальным аппликатором, который имеет валидированные показатели времени контакта и давления при отборе.
Свабы используют преимущество при мониторинге оборудования, которое невозможно отобрать с помощью контактной пластины из-за его конструкции, например, изогнутой или цилиндрической поверхности.
Вне зависимости от выбранного метода, и контактные пластины и свабы должны быть отвалидированы до проведения валидации очистки, чтобы показать, что они пригодны к использованию для мониторинга (восстановления микроорганизмов) данного типа поверхностей.
Не существует отраслевых стандартных критериев приемлемости. Существуют меры, которые можно предпринять для максимизации восстановления, такие как использование аппликаторов при работе с контактной пластиной (которые контролируют время и давление) и подбор типа сваба (где ворсистые свабы обеспечивают более точное обнаружение по сравнению с тампонами с острым наконечником).
Ни один из предложенных методов не обеспечит 100% улавливание всего загрязнения, микробиолог должен знать об ограничениях различных методов и понимать, какие из них являются наиболее точными. Кроме того, используемые питательные среды, а также температура и время инкубации должны быть квалифицированы с точки зрения роста и размножения микроорганизмов.
При прямом отборе проб критическое значение имеет правильность выбора точек мониторинга. Многие подходы к валидации очистки предполагают, что остатки химических агентов равномерно распределены по поверхности оборудования. Однородность распределения химических веществ может иметь место, этот подход трудно применим к микроорганизмам. Точки для мониторинга должны выбираться на основании оценки наихудшего возможного микробного загрязнения в локациях, которые потенциально труднее всего очищать.
В отличие от прямого отбора проб, метод смыва дает косвенные показатели чистоты. Промывные воды могут лишь подтвердить качество промывной воды, но не поверхности.
Метод смыва особенно применим в случаях, когда необходимо проанализировать чистоту большой площади поверхности или когда части оборудования не могут быть разобраны и рассоединены для прямого отбора проб.
Однако один только метод смыва не достаточен для проведения оценки микробиологического статуса оборудования. Так как микроорганизмы могут оставаться прикрепленными к поверхностям оборудования, формируя конгломераты, которые подвергаются не достаточной обработке химическими веществами и промывными водами.
Промывные воды обычно проверяются на бионагрузку с использованием метода мембранной фильтрации, где минимум 100 мл тестируется с использованием фильтра 0,45 мкм. Этот объем достаточен с точки зрения соответствия требованиям фармакопеи, при условии, что образец является репрезентативным.
Можно взять образец большего объёма, поскольку присутствующие микроорганизмы не однородно распределены в объёме образца; контраргументом такого подхода является что если отбор проб с финальной промывки был корректно проведен по времени (после очистки), то не будет происходить восстановление микроорганизмов на поверхности, а значит объем 100 мл является репрезентативным. Выбранная питательная среда так же должна быть пригодна для исследований воды (например, агар R2A пригоден для воды для инъекций). По мере тестирования микробиологических образцов следует сообщать о любых проблемах с сопутствующими химическими анализами. Если, например, уровень общего органического углерода в образце высок, это может означать, что промывная вода содержит химические остатки, и это может сделать микробный тест не валидным.
Требование к тесту на эндотоксины всегда должно применяться к оборудованию, которое будет стерилизоваться и использоваться в производстве стерильных продуктов.
Высокие уровни эндотоксина устойчивы к стандартным температурам последующей обработке очищенного оборудования (например, стерилизации).
Для не стерильного производства необходимость оценки промывных вод на бактериальные эндотоксины должна определяться оценкой риска. Наиболее распространенным методом анализа эндотоксина в воде является ЛАЛ -тест.
При использовании методов, описанных выше, важно в начале оценить уровень микробной нагрузки, а также типы выделяемых микроорганизмов. Идентификация выделенных микроорганизмов до рода в данном случае будет оправданной, так как только благодаря проведенной идентификации возможно разработать правильную программу очистки оборудования и подобрать необходимые химические агенты.
Рутинный контроль процесса производства
При разработке процесса очистки необходимо так же оценивать условия использования оборудования, то есть после завершения всех методов очистки (и любой последующей санитарной обработки или стерилизации).
В таком случае допустимо тестирование бионагрузки образца продукта с использованием метода общего микробного числа (например, методом мембранной фильтрации). Следует отметить, что такое тестирование является косвенной мерой и должно использоваться только для подтверждения эффективности очистки, а не вместо нее.
Необходимо гарантировать надлежащее хранения оборудования, как до, так и после обработки (например, очищенное оборудование должно быть полностью отделено от грязного оборудования, а очищенное оборудование не должно храниться во влажной зоне, такой как моечный отсек). Информацию о пригодности зон для хранения оборудования можно получить из данных мониторинга окружающей среды, полученных в результате мониторинга, проводимого в зонах хранения последнего.
В дополнение к оценке микробиологического статуса зон хранения необходимо учитывать временной интервал, в течение которого оборудование остается чистым, это является важнейшей частью работ по валидации очистки.
Из всех используемых методов, описанных выше, метод прямого отбора проб, является наиболее репрезентативным с точки зрения подтверждения очистки.
Так как при отборе проб со стадии последнего ополаскивания (финальная промывочная жидкость) можно получить данные лишь о том, что количество ополаскивании (и химическая обработка до этого) было достаточными, однако контаминация может остаться прикрепленной к поверхности и не обнаруживаться в образце промывной воды.
Установка критериев приемлемости
Регуляторные органы не дают прямых указаний о критериях приемлемости микробиологических испытаний валидации очистки.
Это связано с тем, что приемлемые критерии могут быть определены только путем оценки риска, и зависят от типа производственного процесса (стерильное/не стерильное производство).
Хотя критерии не определены Фармакопея США, Европейская Фармакопея указывают:
• Для бионагрузки: не более 10 КОЕ/100 мл;
• Для эндотоксинов: не более 0,25 ЕЭ/мл.
Для поверхности может быть принято значение равное для теста на бионагрузку, то есть не более 10 КОЕ на см2 (для контактной пластины) или на зонд-тампон.
Для нестерильного оборудования широко используется формула, разработанная Docherty в 1999 году.
Поскольку валидация очистки является документированным процессом, микробиологические параметры валидации очистки необходимо регистрировать.
В документации следует охватить следующие моменты:
• Образцы для микробиологических испытаний: типы и количество образцов, например, промывные воды, зонд-тампоны, контактные пластины и др.
• Схема отбора проб, показывающая, где отбираются образцы для микробиологического тестирования
• Ссылка на стандартные операционные процедуры отбора проб.
• Подтверждения наличия обучения по отбору проб
• Чек-лист для записи времени отбора образцов
• Условия передачи образцов
• Время поступления образцов в микробиологическую лабораторию.
• Подробности испытаний
• Список всех расходных материалов и номеров их партий (например, номер партии использованных зонд-тампонов)
• Раздел результатов
• Критерии приемлемости
• Запись любых отклонений от процедуры
• Заверение результатов руководством лаборатории.
Сложности остатков химических загрязнений
Хотя эта статья посвящена оценки микробиологического статуса оборудования после очистки, важно, чтобы микробиолог понимал риски, связанные с любыми оставшимися загрязнениями технологического оборудования. Белок из самого продукта или остатки питательной среды (например, после проведения симуляции асептического розлива), могут выступать факторами роста для любых микроорганизмов, которые смогут выжить в процессе очистки, и загрязнят оборудование во время хранения. Размножение микроорганизмов при наличии питательных веществ и благоприятных температур велико.
При проведении валидации очистки часто выбирается один загрязняющий агент как «наихудший случай». Выбор часто основан на таком факторе, как вязкость.
Следует уделить внимание способности загрязняющего агента поддерживать и стимулировать рост микроорганизмов. Вязкое вещество, которое не является субстратом для роста и размножения микроорганизмов может представлять меньший риск, чем вещество, способствующее росту, например, остатки питательной среды. При оценке риска важно время выдержки оборудования в грязном состоянии, поскольку чем дольше агент, способствующий росту, остается в контакте с оборудованием, тем больше вероятность микробиологического размножения.
Валидация очистки должна проводиться в конце процесса очистки. Это должно происходить
сразу по окончания очистки (пробы финального ополаскивания) и как только оборудование высохнет (для прямого отбора проб с поверхности).
Также необходимо определить, как долго оборудование можно оставлять после использования и без очистки. Последнее сопряжено с риском увеличения уровня контаминации вследствие размножения микроорганизмов.
Существуют два ключевых понятия в отношении оборудования - «время чистого хранения» и «время грязного хранения». Время чистого хранения — это время между завершением очистки и началом следующей производственной операции. Что касается времени грязного хранения - оно определяется как время между окончанием производства и началом процесса очистки. Валидация очистки должна оценивать максимальное время грязного хранения, поскольку такое оборудование сложнее очистить (с течением времени загрязнение становится труднее удалить), и вероятность накопления любого микробного загрязнения с течением времени растет.
Причины неудач микробиологических тестов
Обнаружение микроорганизмов в промывной воде свидетельствует о том, что обработка с применением химических агентов была недостаточной, либо недостаточными являются количества ополаскивании. Когда микроорганизмы обнаруживаются в образцах с поверхностей, это означает, что произошло их прикрепление и что может потребоваться пересмотр подхода к очистке.
Иногда наличие случайных вылетов микробиологического роста может указывать на биопленку, где высвобождение микроорганизмов происходит по непредсказуемой схеме.
Биопленка — это группа микроорганизмов, где клетки прикрепляются друг к другу и к поверхности. Биопленки образуют многие бактерии, включая грамположительные (например, Bacillus spp и Staphylococcus spp) и грамотрицательные виды (например, Escherichia coli или Pseudomonas aeruginosa).
Биопленка не всегда возникает, в следствии прикрепления микробной клетки к поверхности, на ее образование влияют тип и состояние поверхности (например, наличие микротрещин), время и тип микроорганизма и их количества; микробная клетка может прилипнуть к поверхности либо временно («обратимо») либо необратимо.Клетки микроорганизмов в биопленке показывают большую устойчивость к экстремальным условиям : устойчивы к химической обработке и промыванию.Промывки сами по себе слабо влияют на биопленку и не могут удалить ее с поверхности.
Эффективность очистки и дезинфекции будет частично зависеть от того, каким образом бактерии прикреплены к поверхности: обратимо или не обратимо.
Дезинфектанты наиболее эффективны для микроорганизмов, находящихся в суспензии, в планктонном состоянии, эффективность вырастает при увеличении времени контакта и поднятии температуры. На это опираются схемы мойки очистки и дезинфекции, однако по этой причине биопленки показывают высокую выживаемость. По этим причинам основная цель очистки и дезинфекции оборудования не бороться с биопленками, а препятствовать их формированию. Необходимо снижать количество застойных зон через соответствующий дизайн оборудования.
Оборудование должно быть спроектировано таким образом чтобы оставаться доступным для обслуживания и очистки. Примером неудачного дизайна и проектирования может выступать трубопровод, где используются шаровые краны. Вторым примером - длинная магистраль трубопровода. Оценка проекта должна включать застойные зоны и связанный с ними риск образования биопленки.
Среди явных ошибок программы очистки оборудования внимание заслуживают две: неверный выбор химического агента или не достаточное количество ополаскивании.
Иногда химический агент может быть подходящим, но время контакта или рабочая температура могут быть неподходящими. В ходе валидации очистки важно так же оценить временной интервал после окончания производства и до начала процедуры очистки. Так как по мере высыхания оборудования количество загрязняющих остатков может повлиять на проникающую способность чистящего или дезинфицирующего средства и существенно снизить антимикробную активность последних.
Ошибка отбора проб может возникать, если, например отдельный клапан для отбора проб не подлежит процессу очистки (полностью или частично). Ошибки при отборе проб могут также возникнуть, если не соблюдается инструкция по отбору проб.
Наряду с очисткой оборудования необходимо принять меры для предотвращения повторной контаминации.
Микробиологический риск возникает из-за того, что оборудование остается влажным после очистки. Например, из-за застоя воды, остающейся внутри оборудования. Оставшаяся вода является источником роста для вегетативных клеток. Если оборудование остается сухим, возможности для размножения микроорганизмов значительно сокращаются.